1、SDS裂解液是一种比较强烈的细胞组织裂解液，常用于组织细胞中难溶蛋白的裂解。

2、本产品具有有强烈的蛋白变性作用，不能用于非变性蛋白方面的研究。

3、本产品裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、ChIP(染色质免疫共沉淀，chromatin immunoprecipitation)等。

4、由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本产品裂解得到样品的蛋白浓度。建议使用晶彩生物生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。

产品编号	JC-PL004	JC-PL005	JC-PL006
产品名称	NP-40裂解液	SDS裂解液	Western及IP细胞裂解液
裂解强度	温和	强	温和
对膜蛋白的提取	一般	很好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	较好	很好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
主要用途	WB, IP, co-IP	WB, co-IP	WB, IP ,co-IP

原理：

   阴离子去垢剂SDS促进细胞膜的崩解，特别适用于膜蛋白或者细胞骨架蛋白的裂解。

操作步骤：

对于培养细胞样品：
1、融解SDS裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2、对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150—250ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
3、充分裂解后，10000-14000rpm离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150ul裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200ul或250ul。如果用于ChIP，建议6孔板每孔细胞至少加入200ul裂解液。

对于组织样品：
1、把组织剪切成细小的碎片。
2、融解SDS裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3、按照每20毫克组织加入150—250ul裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)；
4、用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟；
5、充分裂解后，10000-14000rpm离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作；
6、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

可以制备样品数：

样品种类	样品来源	收获细胞数	RIPA用量	可制备样品数
细胞	6孔板	2.5*106	150-250ul	400-600
	60mm培养板	5.2*106	300-500ul	200-300
	90mm培养板	12.2*106	500-1000ul	100-200
	25cm2培养瓶	5*106	300-500ul	200-300
	75cm2培养瓶	2*107	1000-2000ul	50-100
组织	20mg组织块		150-250ul	400-600